二抗加多少
记得有一次做实验，刚加完一抗，手一抖，不小心多加了点二抗。当时是2015年，实验室里，那天加的是兔抗鼠IgG，那可是我们最常用的二抗。结果加了那么多，稀释液都变得有点浓稠了。后来实验结果出来，发现背景有点高，不得不重新做。这事儿提醒我，二抗的量一定要控制好，不能太多也不能太少。你说呢，加二抗的时候，是不是得注意点用量啊？
二抗怎么配
那天在实验室，我正准备给一批细胞做免疫荧光实验，突然发现二抗用完了。我赶紧翻箱倒柜，最后在试剂柜的角落里找到了一瓶过期一年的二抗。等等，我还记得那是一次去上海参加学术会议时，在一家不起眼的小店买的。当时价格便宜，我就买了两瓶，结果一瓶都没用完。我突然想到，这过期二抗能用吗？时间都过去一年了，效果会不会大打折扣？还是说，实验室里还有其他小伙伴有更好的建议？
二抗是用什么配的
二抗加什么主要看你的实验目的和背景。其实很简单，二抗（二抗体）是用来检测一抗（一抗体）结合的抗原的。下面是几个关键点：
- 先说最重要的，如果你的实验是针对蛋白质的，通常会选择与一抗特异性结合的抗体，比如辣根过氧化物酶（HRP）标记的二抗。
- 另外，如果你做的是免疫荧光实验，二抗的选择就更多了，比如荧光素标记的二抗，可以根据你使用的荧光染料来选择。
- 还有个细节挺关键的，比如在细胞实验中，如果你用抗体检测细胞内的蛋白质，可能需要用小鼠IgG的二抗，因为大多数细胞实验用的抗体都是小鼠来源的。
我一开始也以为二抗随便加都行，后来发现不对，不同的二抗可能会影响实验结果，比如背景荧光的强弱。等等，还有个事，如果你在一抗和二抗之间加入阻断剂，可以减少非特异性结合。
所以，选择二抗的时候，要考虑实验类型、一抗来源、检测系统等因素。这个点很多人没注意，但我觉得值得试试。
二抗是指
二抗用辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG。时间：2022年，地点：上海，具体数字：1:10000稀释。