首伯蕴
2025-08-15 11:17:51一抗稀释:1:1000 二抗稀释:1:2000
玉叔向
2025-04-16 10:25:06这稀释嘛,得看具体情况,你用的一抗和二抗是啥性质的?2022年,我遇到过这种情况,当时用的是小鼠抗人蛋白的单克隆抗体,那个稀释比例就挺讲究的。一般是一抗稀释到1:1000,二抗稀释到1:5000。不过啊,这还得根据你的实验要求来调整,有时候实验条件不同,可能得适量增减。记得啊,实验前最好先做个预实验,看看效果咋样。我当时也懵,后来才反应过来,可能我偏激了点。
弭季吟
2025-05-17 16:35:36这问题问得好,一抗二抗稀释嘛,得看具体情况。我当年在做实验的时候,一般是这样操作的:
1. 时间点:2012年,我在上海的一家生物科技公司做研发,那时候我们用的稀释比例是这样的。
2. 稀释液:首先你得准备好稀释液,常用的有PBS(磷酸盐缓冲盐水)或者TBS(Tris缓冲盐水),这个得根据你具体实验要求来定。
3. 稀释比例:一般来说,一抗的稀释比例在1:100到1:1000之间,二抗的稀释比例在1:500到1:2000之间。这个范围是参考值,具体还得看你的实验条件。
4. 操作步骤:
- 先取适量的稀释液,比如10毫升。
- 然后加入一抗,按照1:1000的比例,也就是10毫升稀释液加10微升一抗。
- 搅拌均匀后,再加入二抗,按照1:1000的比例,也就是10毫升稀释液加10微升二抗。
- 最后,再次搅拌均匀。
5. 注意事项: - 稀释液要现配现用,避免长时间放置影响效果。
- 稀释过程中,要注意无菌操作,避免污染。
- 稀释后的抗体要避光保存。
说实话,我当时也没想明白为什么稀释比例要这样设置,后来查阅资料才知道,这是根据抗体和底物的结合能力来确定的。不过,具体操作起来,还是得根据你自己的实验条件来调整。
臧仲正
2026-02-03 12:59:10这个问题我以前还真研究过。记得那年我在实验室,做那个蛋白质印迹实验,就是那种Western Blot,那玩意儿讲究可多了。一抗二抗的稀释嘛,这个得根据具体的抗体和实验条件来定。
我那时候用的抗体,是那种货真价实的,做Western Blot的标配。一抗通常稀释个1:1000到1:5000,二抗稀释得更少,一般是1:5,000到1:20,000。但是这得根据你的抗体说明书来,因为不同的抗体,它的灵敏度不一样。
比如说,我那次用的抗体,在1:3,000的稀释度下效果最好。这个稀释度是通过不断试错找出来的,你先稀释个1:1,000,然后看效果,不行再稀释,直到找到最合适的那个点。
记得有一次,有个新手小妹妹问我怎么稀释,我就给她示范了整个过程,从计算稀释比例,到实际操作,一点一滴慢慢来。她后来做实验的时候,效果也挺好的。
,对了,稀释抗体的时候,要记得用PBS或者稀释缓冲液,不要用自来水,那个会影响抗体活性的。这块儿我就没碰过,不太敢乱讲,但是一般情况下,实验室里都是这么操作的。
总之,一抗二抗的稀释,得根据抗体说明书和实验条件来定,多试几次就能找到最合适的比例了。