二抗用什么配置

二抗一般使用1:2000-1:5000稀释，具体根据实验和抗体而定。

前年夏天，我还在实验室做细胞培养，那天刚做完二抗孵育，突然有个师兄问我：“二抗用什么配置？”我随口回答：“一般是1:5000吧。”师兄瞪大了眼睛：“，你怎么记的这么准确？”我笑着摇头：“习惯了，毕竟我做了这么久，连配比都成了条件反射。”
等等，还有个事，我记得去年我参加一个学术会议，有个专家说，其实二抗的浓度还得根据实验的具体情况来定。比如你的底物是辣根过氧化物酶，那么二抗浓度可以适当低一点；如果是碱性磷酸酶，那可能需要高一点。细节决定成败，不能一概而论。
我突然想到，做科研真是讲究严谨，每一个小步骤都不能马虎。那，你的二抗浓度选对了吗？

那天在实验室，我正准备用二抗做Western Blot，突然想起上次用错二抗导致结果不理想的事。记得那会儿是2019年，我在上海的一所大学实验室，当时用的二抗是辣鸡牌的，结果蛋白条带模糊不清。后来换成了进口品牌，效果立竿见影。配置嘛，一般是按照说明书来，但关键是要看你的目的。你是想提高灵敏度还是增强背景对比？等等，还有个事，我突然想到，用二抗前，得先确定你的抗体特异性强不强。